曾经听说过Gram染色和抗生素吗？这是它的开始。1884年，汉斯基督教克，丹麦小菌学家试图找到一个适用于所有细菌的普遍污点。In the process, he discovered that bacteria could be divided into two different groups — one that retained a stain, called ‘gram-positive,’ and one that didn’t, called ‘gram-negative.’ His unique method for identifying these two groups became the first step in any bacterial identification process. Even the simple determination that a bacteria specimen is gram-positive or gram- negative can direct a doctor in diagnosis, as different bacteria cause different diseases. For example, the bacteria that causes scarlet fever is gram-positive, while that which causes typhoid or cholera is gram-negative.
克染色有助于医生做出诊断，但它也可以帮助建立治疗方法吗？克分类和抗生素使用之间的关系是什么？常见的抗生素是否与革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌相互作用？通过实验回答这些问题。
问题：是否将四种常见的抗生素（青霉素，氨苄青霉素，新霉素和红霉素）对革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌具有相同的影响？
观察/收集数据：做一些研究，以查找有关抗生素和克染色的信息，以便您能够做出明智的假设。
假设：根据您的研究，写一个详细的假设预测问题的答案。
实验：测试假设的实验需要两部分。在一部分中，在细菌培养物上进行革兰氏染色，以确定哪些是革兰氏阴性的并且是革兰氏阳性的。在第二部分中，建立一个受控实验，测量每种类型抗生素对每种类型的细菌的效果。使用化学品和细菌可以危险。在你开始前，阅读以下安全说明。
安全注意事项
化学品
通常用于制备载玻片的化学物质可能是有毒的，腐蚀性或具有其他相关危险。在使用化学物质之前，请务必仔细阅读整个标签。确保您了解所涉及的危险，适当的安全设备佩戴，以及在泄漏或与您的皮肤接触的情况下您将进行的。用于革兰污染过程的污渍将使衣服和皮肤变色。基本的安全设备您应该穿的是安全护目镜（飞溅型），化学耐磨手套和化学抗性实验室围裙。在干净，通风良好的整洁区域工作，您可以快速擦拭溢出物。始终保持化学瓶紧密盖住。
细菌
虽然大多数环境细菌对健康个体没有危害，但曾经集中在殖民地中，它们可能会危险。为了尽量减少风险，在处理细菌的同时戴一次性手套，并在之前和之后彻底洗手。在细菌研究中切勿吃或喝，也不要吸气或摄取生长的培养物。在免费房间内工作，尽可能减少气流。保持培养介质的培养皿封闭 - 优选胶带关闭 - 除非采样或消毒。即便如此，只需用足够的培养皿即可用漂白剂或70％异丙醇插入工具或覆盖介质。完成后，在塑料袋中的封印菜肴并处理。用漂白剂或酒精覆盖意外破裂或溢出10分钟，然后小心地扫过，密封在塑料袋中，并丢弃。
一部分一克污点
你需要什么：
- 活细菌培养 -芽孢杆菌和Rodospirillum rubrum.。（你也可以养成你自己的文化琼那和培养皿）
- 接种针头
- 克染色套件（包含水晶紫色污渍，革兰碘染色，乙醇溶剂，Safranin o备体，普通显微镜载玻片，药物滴管，盖玻片）
- 洗瓶
- 复合显微镜
你做什么：
革兰污染过程的一些步骤很难完美地进行。为了练习，这是一个好主意，让“控制”幻灯片。尝试从牙齿之间收集一些细菌（使用牙签）并将其放在带有水滴的滑块上。如果正确完成克染色程序，则载玻片应具有革兰氏阴性和革兰氏阳性细胞的混合物以及具有粉红色核的一些中性粒细胞（白细胞）。尝试后，使用以下程序染色每种活细菌文化：
1.通过将接种针头放入蜡烛火焰中灭菌。让它冷却3-5秒。
2.通过将少量细菌与接种针头上的清洁玻璃载玻片上的一个培养物放置少量细菌来制作标本涂抹。拿另一个滑块并使用其边缘刮去或“涂抹”样品成非常薄的材料薄膜。
3.让样品在滑动空气中干燥，然后通过将载玻片传递通过蜡烛火焰3-4次来加热它。（幻灯片不应该触摸太热，并且在通过火焰时它应该永远不会停止。）
4.用1-2滴覆盖标本水晶紫色染色60秒，然后从水龙头或从洗涤瓶中的稍微温和喷射的速度下来轻轻洗净它。（如果水运行太快并用太多的力击中滑块，则将被清洗。）
5.用几滴覆盖标本克的碘60秒;然后将样品再次像步骤4一样轻轻洗净样本。
6.使用乙醇作为溶剂。这是最敏感的步骤，因为如果乙醇留在样品上的时间过长，则它将脱色革兰氏阳性细胞以及革兰氏阴性。将滑块稍微倾斜并逐滴在样本上方的载玻片上施加酒精，使得酒精在整个样本上延续。当流出载玻片边缘的流体不再有色时，停止施加醇。涂片的最薄部分应该是无色的。这需要5秒钟。再次轻轻洗涤滑块。注意，革兰氏阳性细胞将保留一些紫色着色，但大部分染色将被溶剂冲洗。
7.用几滴覆盖标本Safranin.染色为抗衡污染60秒，然后再次轻轻洗涤。
8.用吸收纸张呈现滑块（如果您没有别的，纸巾会工作），但不要擦样品涂抹。将盖玻片放在涂片上。
9.现在您准备在每个放大电平的显微镜下检查您的幻灯片。如您所要，寻找紫色的细胞。这些是革兰氏阳性细胞，其保留了晶体紫色染色。粉红色或红色的细胞是革兰氏阴性细胞。在这些细胞中，将晶体紫通过乙醇洗掉并用Safranin替换。
一旦您确定了哪些实时文化，克明了革兰氏阴性，这是克肯定的，清楚地标记并继续前进到实验的下一部分。
第二部分 - 抗生素测试
测试细菌对抗生素敏感性的一种方法是使用Kirby-Bauer或'盘扩散'方法。该方法涉及测量抑制在培养物中的抗生素椎间盘周围的细菌生长。
你需要什么：
你做什么：
1.根据标签上的方向准备琼脂，然后将10-15毫升倒入每个培养皿中（足以覆盖盘底）。让菜架（覆盖）大约一个小时，直到琼脂公司坚定。
2.对接种针进行消毒，然后用革兰氏阳性细菌接种一道菜。在琼脂表面上轻轻锯齿，转动盘，再次进行。几次执行此操作以获得最大分布。
3.将每种抗生素类型的一盘放在琼脂上的不同地方（使用无菌镊子）。轻微按下光盘以将其固定在琼脂中。完成后盖上盘子。
4.用革兰氏阴性细菌重复步骤2-3。
5. 24小时后检查每种菜。如果细菌培养到抗生素椎间盘的边缘，它不易发生抗生素。如果椎间盘周围有一个圆形区域，则抑制细菌生长，测量和记录圆的直径。记下每种培养皿中每种抗生素盘的效果。您也可能希望拍照。
6.在48小时后重复步骤5。
7.当你完成观察你的细菌文化时，将一汤匙家庭漂白剂放入菜肴中，覆盖它们，将它们密封在塑料袋中，然后将它们扔掉。
分析数据/表单结论
分析您的数据。每种抗生素如何在每种细菌培养中表现出？抗生素是否更加有效地对抗革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌？您研究的局限性是什么？如果您测试了更多数量的细菌文化，您能获得更准确的结果吗？
表格结论。您的结果是否支持您的假设？为什么或者为什么不？您的成果如何告诉您有关处方抗生素的过程？您如何继续进行这项研究，以了解更多关于抗生素和细菌关系的更多信息？
如果您对这些形式的抗生素过敏，请勿使用抗生素椎间盘。
您使用的细菌也可以危险。在处理细菌培养之前和之后，总是彻底洗手。以前洗涤它们会尽量减少您正在生长的细菌培养物的污染。之后洗涤它们将使您暴露于可能在您的文化中生长的有害细菌。
当你完成学习文化时，将足够的家用漂白剂倒入其中以覆盖盘子的底部。然后覆盖培养物，将其封印在塑料袋中，然后扔掉它。
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